感受态法改变的是膜还是壁的通透性？

秦四哥

                              

用适当的方法将形成的重组DNA分子转移到合适的受体细胞中。常用的受体细胞有大肠杆菌、枯草杆菌、酵母菌和动植物细胞等。例如，用质粒作为载体，宿主细胞应该选择大肠杆菌，用氯化钙处理大肠杆菌，增加大肠杆菌细胞壁的通透性，使含有目的基因的重组质粒进入大肠杆菌宿主细胞。

——浙科版教材选修3《现代生物科技专题》P7

如果运载体是质粒，受体细胞是大肠杆菌，最常用的遗传转化技术就是氯化钙法(calciumchloridemethod)。这一方法也是扩增表达载体的常用方法,受体细胞经过一定浓度的氛化钙处理后，细胞膜的通透性会发生变化，可以允许含有目的基因的运载体分子进入感受态细胞。例如，携带目的基因的质粒DNA分子进入大肠杆菌细胞后，能够在细菌细胞内大量繁殖，比细菌本身的繁殖速度还要快很多倍，因此，在很短的时间内，就可以获得大量的目的基因及目的基因的表达产物。

——北师大版教材选修3《现代生物科技专题》P79

科学家通过实验发现，经过适当处理后，细胞膜对DNA的通透性会发生改变，细胞变得容易接受外来的DNA，处于这种状态的细胞称为感受态细胞。

——苏教版教材选修3《现代生物科技专题》

其实光CaCl2处理是不够的，还要低温处理，一般的解释是经低温（如0℃）处理后，细胞膜处于液晶相，局部出现裂隙，而Ca2+的作用是有效中和细胞膜表面的和DNA上的负电荷，确保两者顺利地靠近，然后经膜裂隙进入细胞。

——汉水群木可老师热心解答

将处于对数生长期的细菌置入0℃的CaCl2低渗溶液中，使细胞膨胀，同时Ca2+使细胞膜磷脂层形成液晶结构，使得位于外膜与内膜间隙中的部分核酸酶离开所在区域，这就构成了大肠杆菌人工诱导的感受态。此时加入DNA, Ca2+又与DNA结合形成抗脱氧核糖核酸酶（Dnase）羟基-磷酸钙复合物，并黏附在细菌细胞膜的外表面上。经短暂的42℃热脉冲处理后，细菌细胞膜的液晶结构发生剧烈扰动，随之出现许多间隙，致使通透性增加，DNA分子便趁机进入细胞内。

——汉水群流浪在线老师热心解答

Microbial geneticistsexploit transformation to move DNA (usually recombinant DNA) into cells.Because many species, including E. coli, are not naturally transformationcompetent, these bacteria must be made artifcially competent by certaintreatments. Two common techniques are electrical shock and exposure to calciumchloride. Both approaches render the cell membrane temporarily morepermeable to DNA, and both are used to transform E. coli cells that have beenmade artifcially competent. To increase the transformation frequency with E.coli, strains that lack one or more nucleases are used. Tese strains areespecially important when transforming the cells with linear DNA, which isvulnerable to attack by nucleases. It is easier to transform bacteria withplasmid DNA since plasmids can replicate within the host and are not as easilydegradedasarelinearfragments.

——国外教材《Prescott'sMicrobiology》.9th.P395.

包括大肠杆菌在内的多种微生物，自然情况下都不处于转化的感受态，这些细菌必须经过一定的处理，人为地令其处于感受态。电击和氯化钙处理是常用的两种方法。两种方法都使细胞膜对DNA的通透性暂时增加，都能令大肠杆菌处于人为的感受态中。

——汉水群甘奈橘老师热心解答并翻译